Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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GPRC5D Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403114-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GPRC5DO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GPRC5D (h) e o Plasmídeo Double Nickase GPRC5D (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GPRC5D. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GPRC5D Anticorpo (E-2): sc-515733
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GPRC5D Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403114-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GPRC5D Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403114-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GPRC5D (receptor acoplado à proteína G, classe C, grupo 5, membro D) é um GPCR órfão humano com expressão marcante em compartimentos epiteliais diferenciados, onde está associado à regulação do estado celular, respostas ao estresse e programas de sinalização dependentes do contexto. Como uma proteína semelhante a receptor de membrana, o GPRC5D está posicionado para modular vias a jusante que se integram ao MAPK e a outras redes de sinalização associadas a GPCRs, influenciando saídas transcricionais e a adaptação celular. Alterações na expressão de GPRC5D foram relatadas em diversos contextos de doença, incluindo neoplasias, tornando-o um ponto útil para estudar marcadores de linhagem, sinalização mediada por receptores e regulação gênica associada a tumores. Seus padrões de expressão restritos também sustentam investigações sobre especificidade de tipo celular e biologia de proteínas de superfície em modelos humanos.
GPRC5D O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GPRC5D em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GPRC5D. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GPRC5D. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GPRC5D interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.