GPR56 Double Nickaseプラスミド (r): sc-437293-NIC
- 対象生物種: rat
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- GPR56 Double Nickaseプラスミド (r)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- GPR56ダブルニカースプラスミド（r）およびGPR56ダブルニカースプラスミド（r2）は、を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
GPR56 Double Nickaseプラスミド (r) | sc-437293-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GPR56 Double Nickaseプラスミド (r2) | sc-437293-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GPR56（ADGRG1）は、細胞外マトリックスからの情報を細胞内シグナル伝達と統合し、細胞—細胞間および細胞—マトリックス間相互作用を制御する接着型Gタンパク質共役受容体（GPCR）をコードする。Gタンパク質との共役や、RhoA/ROCK依存的な細胞骨格リモデリングを介して、GPR56は接着、遊走、極性に影響を及ぼし、神経系における自然免疫やグリア細胞の挙動の調節にも関与することが示されている。発達中の大脳皮質では、GPR56活性の変化がニューロンの位置決めや基底膜の完全性に影響し、ADGRG1の遺伝学的破綻は両側前頭頭頂型多小脳回（bilateral frontoparietal polymicrogyria）などの皮質形成異常と関連する。したがってラット系においてGPR56は、接着型GPCRシグナル伝達、細胞外マトリックスの感知、ならびに神経発達・神経炎症機構を研究する上で有用な標的ノードである。
GPR56 ダブルニカースプラスミド（r）は、rat 細胞株における 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。