Plasmide Double Nickase (r) GPR56: sc-437293-NIC
- Espèces cibles: rat
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (r) GPR56 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide GPR56 Double Nickase (r) et le plasmide GPR56 Double Nickase (r2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant . Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (r) GPR56 | sc-437293-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (r2) GPR56 | sc-437293-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GPR56 (ADGRG1) code un récepteur couplé aux protéines G d’adhérence qui intègre les signaux de la matrice extracellulaire aux voies de signalisation intracellulaires afin de réguler les interactions cellule–cellule et cellule–matrice. En se couplant aux protéines G et en mobilisant le remodelage du cytosquelette dépendant de RhoA/ROCK, GPR56 influence l’adhérence, la migration et la polarité, et a été associé à la modulation des comportements des cellules de l’immunité innée et des cellules gliales dans le système nerveux. Dans le cortex en développement, une activité altérée de GPR56 affecte le positionnement des neurones et l’intégrité de la membrane basale, et la perturbation génétique d’ADGRG1 est associée à des malformations corticales telles que la polymicrogyrie frontopariétale bilatérale. Dans les modèles chez le rat, GPR56 constitue donc un nœud d’intérêt pour étudier la signalisation des GPCR d’adhérence, la détection de la matrice extracellulaire et des mécanismes neurodéveloppementaux ou neuroinflammatoires.
GPR56 Le plasmide double nickase (r) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus dans les lignées cellulaires rat. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de . Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de . En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de .
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.