GPR35慢病毒激活颗粒(m): sc-425672-LAC

小鼠 Gpr35 基因编码 GPR35，这是一种视紫红质样 G 蛋白偶联受体（GPCR），被认为参与感知小分子配体，并塑造细胞内信号输出，从而影响钙离子通量、cAMP 动态以及下游转录程序。GPR35 活性与免疫细胞的趋化与激活、上皮屏障反应以及更广泛的炎症信号网络的调控有关，其中包括与 MAPK 通路和 NF-κB 依赖性基因表达相交叉的通路。已有研究在与黏膜免疫和代谢稳态相关的组织中报道了 GPR35 的表达与遗传学关联，这推动了在肠道炎症、疼痛信号传导以及心代谢表型等模型中的进一步探索。作为一种保守且具有情境依赖性耦联特征的 GPCR，GPR35 为在原代细胞及疾病相关的小鼠系统中解析受体驱动的基因调控程序提供了一个可操作的关键节点。

GPR35 慢病毒激活颗粒（m）通过将完整的协同激活介导体（SAM）转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中，满足了这一需求，从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Gpr35 表达。

GPR35 慢病毒激活颗粒（m）通过慢病毒转导递送协同激活介导体（SAM）系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂：一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9（D10A和N863A突变），并携带布拉西定抗性基因； 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂；以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA（与两个MS2 RNA适配体融合）并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后，SAM组分得以稳定表达，并在Gpr35转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处，VP64、p65和HSF1协同作用，招募内源性转录 machinery，从而驱动内源性GPR35表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂，并保留原生的 Gpr35 基因组位点和调控架构。

慢病毒载体具有多项实用优势：稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活；高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要；且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性，扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选，以确认并富集成功的转导。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。