Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) GPR14: sc-402393-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) GPR14 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide GPR14 Double Nickase (h) et le plasmide GPR14 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant UTS2R. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: GPR14 Antibody (D-4): sc-514460
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) GPR14 | sc-402393-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) GPR14 | sc-402393-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
UTS2R code pour le récepteur couplé aux protéines G GPR14, un récepteur de haute affinité du neuropeptide urotensine II, qui régule le tonus vasculaire, la contraction du muscle lisse et la signalisation neuroendocrinienne. Lors de la liaison du ligand, GPR14 se couple principalement à Gαq/11, activant la phospholipase C, la mobilisation du Ca²⁺ intracellulaire et la signalisation MAPK/ERK en aval, avec des effets additionnels sur le remodelage du cytosquelette dépendant de RhoA/ROCK. Ces voies relient UTS2R à la modulation de la fonction endothéliale et des cardiomyocytes, de la signalisation inflammatoire et des programmes de prolifération cellulaire. Une altération de la signalisation urotensine II–UTS2R a été associée à la biologie des maladies cardiovasculaires et métaboliques, ce qui étaye des études mécanistiques dans des modèles cellulaires humains pertinents.
GPR14 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus UTS2R dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de UTS2R. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de UTS2R. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de UTS2R.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.