Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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GP-39 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402147-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GP-39O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GP-39 (h) e o Plasmídeo Double Nickase GP-39 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CHI3L1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GP-39 Anticorpo (D-11): sc-393494
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GP-39 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402147-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GP-39 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402147-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CHI3L1 codifica a GP-39 (YKL-40), uma glicoproteína secretada do tipo quitinase-like que não possui atividade enzimática, mas se liga a componentes da matriz extracelular e modula as interações célula–matriz. A GP-39 é produzida por macrófagos, neutrófilos, condrócitos, fibroblastos e células estromais associadas a tumores, influenciando a sinalização inflamatória, a remodelação tecidual, programas angiogênicos e processos ligados à fibrose. Ela é frequentemente estudada em contextos que envolvem vias reguladas por citocinas, como IL-6/STAT3, NF-κB e a remodelação relacionada ao TGF-β, bem como em reparo de feridas e microambientes inflamatórios crônicos. A expressão desregulada de CHI3L1 está associada à artrite e à biologia de doenças fibróticas, à asma e a outros estados inflamatórios das vias aéreas, à neuroinflamação e a fenótipos de progressão do câncer, o que a torna um alvo útil para estudos mecanísticos do acoplamento entre inflamação e remodelação.
GP-39 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CHI3L1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CHI3L1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CHI3L1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CHI3L1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.