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GHR慢病毒激活颗粒(m) | sc-420549-LAC | 200 µl | $455.00 |
小鼠 Ghr 编码生长激素受体(GHR),这是一种单次跨膜的细胞因子受体,介导肝脏、脂肪组织、骨骼肌和免疫细胞中的内分泌与旁分泌生长激素信号。配体结合可促进受体二聚化并激活 JAK2,进而启动下游 STAT5、PI3K–AKT 以及 MAPK/ERK 通路,协同调控个体生长、脂质与葡萄糖代谢以及组织重塑。GHR 依赖的转录程序可调控 IGF 轴相关成分和代谢酶,将受体活性与机体能量稳态联系起来。GHR 信号失调常被用于生物医学研究中模拟生长表型改变、肝脏与脂肪组织代谢功能障碍以及炎症通路变化。
GHR 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Ghr 表达。
GHR 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Ghr转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性GHR表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Ghr 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。