GCSFR Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402269-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- G-CSFRO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase G-CSFR (h) e o Plasmídeo Double Nickase G-CSFR (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CSF3R. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:G-CSFR Anticorpo (A-7): sc-514639
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GCSFR Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402269-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
G-CSFR Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402269-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CSF3R codifica o receptor do fator estimulador de colônias de granulócitos (GCSFR), um receptor de citocinas do tipo I que regula a produção, a maturação e a ativação funcional de neutrófilos na linhagem mieloide. Após a ligação do ligante, o GCSFR sinaliza principalmente por meio das cascatas JAK/STAT, PI3K/AKT e MAPK para controlar a proliferação, a sobrevivência, a diferenciação e o tráfego de progenitores granulocíticos. A regulação rigorosa da sinalização de CSF3R é essencial para a homeostase hematopoética, e a atividade alterada do receptor tem sido associada a mielopoiese desordenada e transformação leucêmica em múltiplos contextos de doença. Como o CSF3R integra sinais de citocinas a programas transcricionais que controlam a granulopoiese, ele é frequentemente estudado em modelos de inflamação, desenvolvimento da imunidade inata e mecanismos de malignidades mieloides.
G-CSFR O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CSF3R em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CSF3R. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CSF3R. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CSF3R interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.