GCDH Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405887-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GCDHO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GCDH (h) e o Plasmídeo Double Nickase GCDH (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GCDH. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GCDH Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405887-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GCDH Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405887-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O GCDH humano codifica a glutaril‑CoA desidrogenase, uma enzima mitocondrial dependente de FAD que catalisa a etapa de descarboxilação oxidativa no catabolismo da lisina, hidroxilisina e triptofano. Ao direcionar o glutaril‑CoA para etapas posteriores do metabolismo de acil‑CoA, o GCDH contribui para o equilíbrio redox mitocondrial e interage com vias de oxidação de ácidos graxos e aminoácidos ligadas à flavoproteína de transferência de elétrons (ETF). A perda de atividade do GCDH está associada a alterações no processamento de ácidos orgânicos e em respostas ao estresse mitocondrial relevantes para erros inatos do metabolismo, como a acidemia glutárica tipo I. Por isso, o GCDH é frequentemente estudado no contexto da função mitocondrial, da toxicidade induzida por metabólitos e da remodelação de vias em modelos de doenças metabólicas.
GCDH O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GCDH em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GCDH. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GCDH. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GCDH interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.