Plásmido Doble Nickase (h) gasdermin C: sc-412690-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)gasdermin C consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa gasdermin C (h) y el plásmido de doble nickasa gasdermin C (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a GSDMC. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) gasdermin C | sc-412690-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) gasdermin C | sc-412690-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El GSDMC humano codifica la gasdermina C, un miembro de la familia de las gasderminas implicado en la muerte celular regulada y la señalización inflamatoria mediante actividad formadora de poros tras su activación proteolítica. La gasdermina C está vinculada a la biología epitelial y puede interactuar con vías que controlan la integridad de la membrana, la liberación de citocinas y las respuestas al estrés que moldean la homeostasis tisular. Se ha informado de una expresión alterada de GSDMC en varias neoplasias y contextos inflamatorios, lo que respalda su uso como un nodo mecanístico para estudiar cómo los programas de muerte celular influyen en la progresión tumoral y la señalización del microambiente. Como efector aguas abajo de eventos impulsados por proteasas, la gasdermina C ofrece una lectura accesible para diseccionar procesos similares a la piroptosis y la inflamación asociada a barreras en modelos celulares humanos.
gasdermin C El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus GSDMC en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de GSDMC. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de GSDMC. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con GSDMC alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.