GABAA Rβ1 Double Nickaseプラスミド (h): sc-403935-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- GABAA Rβ1 Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- GABAA Rβ1ダブルニカースプラスミド（h）およびGABAA Rβ1ダブルニカースプラスミド（h2）は、GABRB1を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
GABAA Rβ1 Double Nickaseプラスミド (h) | sc-403935-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GABAA Rβ1 Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-403935-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GABRB1 は、ヒト GABA\(_A\) 受容体の β1 サブユニットをコードしています。GABA\(_A\) 受容体は、リガンド作動性の五量体塩化物チャネルであり、中枢神経系における速い抑制性神経伝達を担います。β サブユニットの組み込みは、受容体の組み立て、細胞内輸送、シナプス局在に不可欠で、塩化物イオンの伝導性や神経細胞の興奮性を規定します。GABA\(_A\) 受容体シグナル伝達は、活動依存的可塑性、ネットワーク振動、興奮―抑制バランスの恒常性制御とも交差します。GABRB1 の発現変化や受容体組成の変化は、遺伝学的・機能的研究により神経発達性および精神神経系の表現型と関連づけられており、てんかん、知的障害、ならびに関連疾患の基盤機構における重要性が示唆されています。
GABAA Rβ1 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における GABRB1 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、GABRB1内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、GABRB1の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、GABRB1が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。