Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Gα i-1/GNAI1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400652-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Gα i-1/GNAI1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Gα i-1/GNAI1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Gα i-1/GNAI1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GNAI1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Gα i-1/GNAI1 Anticorpo (R4): sc-13533
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Gα i-1/GNAI1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400652-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Gα i-1/GNAI1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400652-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GNAI1 codifica a subunidade alfa inibitória da proteína G, Gαi-1, um componente central das proteínas G heterotriméricas que transmitem sinais de GPCRs para efetores a jusante. Após a ativação do receptor, a Gαi-1 suprime a atividade da adenilil ciclase para reduzir os níveis de cAMP e modula a função de canais iónicos e a sinalização por quinases, incluindo nós das vias PI3K/AKT e MAPK, por meio de saídas tanto de Gα quanto de Gβγ. Esses programas de sinalização regulam proliferação, diferenciação, secreção e migração quimiotática em muitos tipos celulares. O acoplamento desregulado entre GPCR e proteína G e alterações na sinalização dependente de cAMP têm sido implicados na reprogramação de vias associada ao cancro, em respostas inflamatórias e em fenótipos neurológicos, tornando o GNAI1 um alvo útil para dissecação de vias.
Gα i-1/GNAI1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GNAI1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GNAI1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GNAI1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GNAI1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.