Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
FXR1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-420430
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- FXR1 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico FXR1, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: FXR1 Antibody (B-2): sc-374148
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
FXR1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m) | sc-420430 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
Fxr1 codifica la fragile X mental retardation syndrome‑related protein 1 (FXR1), una proteina legante l’RNA che regola l’espressione genica post-trascrizionale controllando stabilità, localizzazione e traduzione degli mRNA. FXR1 si associa ai granuli ribonucleoproteici e partecipa a programmi di metabolismo dell’RNA che modellano crescita cellulare, differenziamento e risposte allo stress, inclusa la modulazione di trascritti legati al citoscheletro e al muscolo. Nel topo, Fxr1 contribuisce all’espressione genica tessuto-specifica e a processi di sviluppo in cui è richiesto un controllo traduttivo rigoroso. La deregolazione delle reti di RNA dipendenti da FXR1 è stata collegata in letteratura ad alterazioni dei segnali di proliferazione e sopravvivenza e a fenotipi rilevanti per la biologia neuro-sviluppativa e neuromuscolare.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO FXR1 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Fxr1 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Fxr1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Fxr1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina FXR1.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Fxr1 per lo studio della segnalazione di FXR1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni Fxr1 critici per la funzione di FXR1
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Fxr1 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal FXR1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal FXR1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Fxr1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal FXR1 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR FXR1 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Fxr1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Fxr1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.