FUS/TLS Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400612-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FUS/TLSO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase FUS/TLS (h) e o Plasmídeo Double Nickase FUS/TLS (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para FUS. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:FUS/TLS Anticorpo (4H11): sc-47711
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FUS/TLS Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400612-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FUS/TLS Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400612-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FUS (FUS/TLS) codifica uma proteína multifuncional de ligação a RNA/DNA que transita entre o núcleo e o citoplasma para coordenar a transcrição, o splicing do pré-mRNA, o transporte de RNA e a dinâmica de grânulos de estresse. FUS participa da resposta a danos no DNA, incluindo o reparo de quebras de dupla fita, por meio de interações com a RNA polimerase II e fatores de reparo que influenciam a estabilidade do genoma. A desregulação, a relocalização incorreta ou a agregação de FUS está ligada à biologia de doenças neurodegenerativas, e a atividade alterada de FUS também tem sido implicada em programas transcricionais oncogênicos. Essas propriedades tornam FUS um alvo amplamente utilizado para estudar o metabolismo de RNA, a proteostase e a sinalização de estresse genotóxico em células humanas.
FUS/TLS O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus FUS em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de FUS. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função FUS. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com FUS interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.