FTβ Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403479-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FTβO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase FTβ (h) e o Plasmídeo Double Nickase FTβ (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para FNTB. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:FTβ Anticorpo (B-7): sc-46664
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FTβ Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403479-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FTβ Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403479-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FNTB codifica a subunidade β da farnesiltransferase de proteínas (FTβ), uma enzima-chave na via de prenilação que catalisa a transferência de um grupo farnesil para proteínas com o motivo CAAX na extremidade C-terminal. Essa modificação lipídica favorece a associação à membrana, a estabilidade proteica e o tráfego subcelular de diversas proteínas de sinalização, influenciando assim vias que controlam proliferação, diferenciação e transporte vesicular. A farnesilação dependente de FTβ está intimamente ligada a redes de transdução de sinal conduzidas por pequenas GTPases e à regulação do citoesqueleto. A desregulação da dinâmica de prenilação e a alteração da dependência da atividade da farnesiltransferase têm sido associadas a contextos de sinalização oncogênica e a outros distúrbios que envolvem complexos de sinalização anômalos localizados na membrana.
FTβ O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus FNTB em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de FNTB. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função FNTB. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com FNTB interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.