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FOXP2 CRISPR Activationプラスミド (m) | sc-431094-ACT | 20 µg | $397.00 |
Foxp2は、フォークヘッドボックス型転写因子FOXP2をコードしており、神経細胞の分化、移動、シナプス可塑性を制御する遺伝子プログラムを統合的に調節する、配列特異的な転写制御因子である。マウスの神経系では、FOXP2は皮質—基底核回路および小脳回路で顕著に発現しており、運動学習や発声に関連する行動に重要な、活動依存的な転写と神経回路の結合性に影響を与える。FOXP2は、より広範な転写ネットワークおよびクロマチン制御ネットワークと連携して、発生のタイミングや回路成熟の形成に関与する。FOXP2依存的な遺伝子発現の制御異常は、神経発達における表現型の変化と関連づけられており、脳の発生と機能における転写制御機構を研究するための重要な足がかりとなる。
FOXP2 CRISPR活性化プラスミド(m)は、基盤となるDNA配列を変更することなく、内因性Foxp2の発現を標的化し、非破壊的にアップレギュレートするアプローチを提供します。
FOXP2 CRISPR 活性化プラスミド (m) は、ヒト細胞株における Foxp2 遺伝子座の高効率かつ部位特異的な転写アップレギュレーションのために設計された、3 つのプラスミドからなる相乗的活性化メディエーター (SAM) システムです。このシステムは、DNA結合能を維持しつつヌクレアーゼ活性を失わせる2つの不活性化変異(D10AおよびN863A)を有する、触媒活性のないCas9(dCas9)を中核としています。このdCas9は、強力な転写活性化因子であるVP64と融合しており、選別用のブラスティシジン耐性遺伝子と共に共発現します。2番目のプラスミドは、dCas9-VP64と協調して機能する二次活性化複合体であるMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードしており、ヒグロマイシン耐性遺伝子と共に発現する。3番目のプラスミドは、標的特異的な20塩基対のsgRNAをコードしており、これはMS2-p65-HSF1複合体を活性化部位に誘導する2つのMS2 RNAアプタマーと融合しており、さらにピューロマイシン耐性遺伝子が付随している。これら3つのプラスミドは、システム構成要素すべてが均等に発現するよう、質量比1:1:1で導入される。
標的遺伝子座に集合すると、SAM複合体はFoxp2転写開始点の上流約200 bpの領域に結合し、そこでVP64、p65、およびHSF1が協調して転写装置を動員し、内因性FOXP2の発現上昇を促進する。ヌクレアーゼ活性を持つCas9とは異なり、 dCas9は二本鎖切断を導入したりゲノム配列を改変したりしないため、天然のFoxp2遺伝子座が保持され、内因性遺伝子座におけるFOXP2依存性の転写応答の研究が可能となります。これにより、機能解析、標的遺伝子の同定、およびFoxp2発現が沈黙または低下した腫瘍細胞におけるFOXP2経路の回復のモデル化を行う上で、貴重なツールとなります。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。