FLRT3 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406632

Panoramica

FLRT3 (proteina transmembrana 3 ricca in leucina e fibronectina) codifica una proteina di membrana a singolo passaggio che, durante lo sviluppo, funge da segnale di adesione cellulare e di guida, coordinando le interazioni cellula-cellula e la crescita dei neuriti. FLRT3 partecipa a reti di segnalazione che coinvolgono le vie del recettore FGF e ligandi di guida extracellulari come i recettori UNC5, influenzando adesione, repulsione e patterning tissutale. Attraverso queste interazioni, FLRT3 contribuisce alla regolazione della migrazione cellulare, della formazione delle sinapsi e della morfogenesi in molteplici contesti tissutali. Alterazioni dell’espressione di FLRT3 e della connettività delle sue vie sono state riportate in studi sui processi di neurosviluppo e in biologia del cancro, a supporto del suo impiego come nodo meccanicistico nella ricerca su adesione e migrazione.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO FLRT3 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene FLRT3 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del FLRT3 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto FLRT3 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina FLRT3.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di FLRT3 per lo studio della segnalazione di FLRT3, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni FLRT3 critici per la funzione di FLRT3
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di FLRT3 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal FLRT3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal FLRT3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus FLRT3. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal FLRT3 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR FLRT3 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia FLRT3 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio FLRT3 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.