FKHRL1/FOXO3a Lentiviral Activation Particles (h): sc-400308-LAC

FOXO3（FKHRL1/FOXO3a）はフォークヘッドボックスO（forkhead box O）ファミリーに属する転写因子で、アポトーシス、細胞周期停止、DNA損傷応答、酸化ストレス耐性、オートファジーに関わる遺伝子の発現制御を通じて、細胞運命の決定を統合的に調節する。その活性はPI3K–AKTシグナル下流の翻訳後修飾によって厳密に制御され、FOXO3の核内局在と転写出力が調節されるほか、代謝ストレス下ではAMPKおよびサーチュイン経路からの入力も統合する。FOXO3依存的なプログラムは免疫恒常性、幹／前駆細胞の維持、細胞老化に影響し、この因子を加齢関連の表現型と結び付けている。FOXO3シグナルの破綻は、腫瘍生物学やストレス耐性に関与するだけでなく、ストレス応答性の転写ネットワークの変化を介して、心血管・代謝疾患および神経変性疾患の病態機序にも関与すると示唆されている。

FKHRL1/FOXO3a レンチウイルス活性化粒子（h）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なFOXO3の発現上昇を可能にします。

FKHRL1/FOXO3a レンチウイルス活性化粒子（h）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、FOXO3転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性FKHRL1/FOXO3aの発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のFOXO3ゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。