Plásmido Doble Nickase (h) FKBP51: sc-401560-NIC

FKBP5 codifica la inmunofilina FKBP51, una isomerasa peptidil-prolil cis-trans que actúa como cocochaperona de HSP90 y modula la señalización de receptores de hormonas esteroideas, incluidos los complejos del receptor de glucocorticoides, andrógenos y progesterona. Mediante interacciones con complejos receptores e intermediarios de señalización, FKBP51 influye en programas transcripcionales sensibles al estrés y se integra con vías como MAPK y NF-κB, que determinan la inflamación y la supervivencia celular. FKBP51 también afecta la proteostasis y procesos relacionados con la autofagia al regular el plegamiento de proteínas y el tráfico de receptores. La alteración de la expresión de FKBP5 o variaciones reguladoras se ha asociado con respuestas al estrés desreguladas y con la biología de enfermedades neuropsiquiátricas e inflamatorias, lo que la convierte en un nodo ampliamente estudiado en la comunicación cruzada endocrino-inmunitaria.

FKBP51 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus FKBP5 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de FKBP5. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de FKBP5. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con FKBP5 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.