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FKBP51双切口酶质粒(h) | sc-401560-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FKBP51双切口酶质粒(h2) | sc-401560-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FKBP5 编码免疫亲和蛋白 FKBP51,这是一种肽基脯氨酰顺反异构酶,作为 HSP90 的共伴侣发挥作用,并调控类固醇激素受体信号传导,包括糖皮质激素受体、雄激素受体和孕激素受体复合体。FKBP51 通过与受体复合体及信号中间体相互作用,影响应激反应相关的转录程序,并与 MAPK、NF-κB 等塑造炎症与细胞存活的通路发生整合。FKBP51 还通过调节蛋白折叠与受体转运,影响蛋白稳态与自噬相关过程。FKBP5 表达异常或调控变异与应激反应失衡以及神经精神和炎症性疾病的生物学相关,因此被广泛视为内分泌—免疫串扰中的关键研究节点。
FKBP51 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 FKBP5 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对FKBP5内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏FKBP5的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了FKBP5基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。