Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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FIGNL1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-410087
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- FIGNL1 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico FIGNL1, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: FIGNL1 Antibody (A-4): sc-398264
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
FIGNL1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-410087 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
FIGNL1 (fidgetin-like 1) codifica una ATPasi della famiglia AAA+ implicata nella regolazione della riparazione del DNA e del mantenimento del genoma attraverso interazioni con il macchinario della ricombinazione omologa. La proteina è stata associata al controllo della dinamica dei filamenti di RAD51 e della processazione delle estremità del DNA, collegandola a vie che risolvono lesioni associate alla replicazione e rotture a doppio filamento. Influenzando gli esiti della ricombinazione e la stabilità cromosomica, FIGNL1 contribuisce alla progressione del ciclo cellulare e alla corretta segregazione del materiale genetico. Un’attività o un’espressione deregolata di FIGNL1 è stata associata ad alterate risposte al danno al DNA osservate nella biologia dei tumori e in altri contesti in cui l’instabilità genomica è una caratteristica centrale.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO FIGNL1 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene FIGNL1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del FIGNL1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto FIGNL1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina FIGNL1.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di FIGNL1 per lo studio della segnalazione di FIGNL1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni FIGNL1 critici per la funzione di FIGNL1
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di FIGNL1 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal FIGNL1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal FIGNL1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus FIGNL1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal FIGNL1 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR FIGNL1 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia FIGNL1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio FIGNL1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.