Fibulin-2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403644-NIC

FBLN2 codifica a fibulina-2, uma glicoproteína secretada da matriz extracelular, enriquecida em tecidos elásticos, que se liga à fibronectina, às lamininas e aos proteoglicanos para regular a montagem da matriz e a mecânica dos tecidos. A fibulina-2 participa da adesão célula–matriz, da organização da membrana basal e da estabilização das fibras elásticas, influenciando processos como remodelamento vascular, reparo de feridas e interações epitélio–mesênquima. Por seus papéis na organização da matriz extracelular e na mecanotransdução, FBLN2 é frequentemente estudado em vias ligadas à fibrose e ao remodelamento tecidual, incluindo respostas associadas a TGF-β e sinalização mediada por integrinas. Expressão desregulada de FBLN2 e alterações na arquitetura estromal foram relatadas em diversas patologias caracterizadas por deposição aberrante de matriz e comportamento invasivo, tornando-o relevante para estudos da biologia de doenças impulsionadas pelo microambiente.

Fibulin-2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus FBLN2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de FBLN2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função FBLN2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com FBLN2 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.