Fatty Acid Synthase Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400440-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Fatty Acid SynthaseO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Fatty Acid Synthase (h) e o Plasmídeo Double Nickase Fatty Acid Synthase (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para FASN. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Fatty Acid Synthase Anticorpo (G-11): sc-48357
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Fatty Acid Synthase Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400440-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Fatty Acid Synthase Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400440-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene humano **FASN** codifica a **sintase de ácidos graxos** (fatty acid synthase), um complexo enzimático citosólico multifuncional que catalisa a síntese *de novo* de **palmitato** a partir de **acetil-CoA** e **malonil-CoA**, utilizando **NADPH**. A atividade da FASN sustenta a homeostase lipídica ao fornecer ácidos graxos para a biogênese de membranas, a palmitoilação de proteínas e a sinalização baseada em lipídios, conectando o estado nutricional a programas de crescimento anabólico. Ela se integra a vias metabólicas centrais, incluindo o transporte citrato–malato–piruvato, a produção de NADPH e redes transcricionais lipogênicas conduzidas por SREBP, e responde à sinalização de insulina e mTOR. A lipogênese dependente de FASN desregulada é amplamente estudada em doenças metabólicas, inflamação associada à obesidade, esteatose hepática e estados proliferativos, nos quais o fluxo lipídico alterado pode remodelar respostas celulares ao estresse e o equilíbrio redox.
Fatty Acid Synthase O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus FASN em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de FASN. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função FASN. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com FASN interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.