FAM171A1 Double Nickaseプラスミド (h): sc-415117-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- FAM171A1 Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- FAM171A1ダブルニカースプラスミド（h）およびFAM171A1ダブルニカースプラスミド（h2）は、FAM171A1を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
FAM171A1 Double Nickaseプラスミド (h) | sc-415117-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FAM171A1 Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-415117-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FAM171A1は、細胞間相互作用や膜関連シグナル伝達の制御に関与すると考えられる膜貫通タンパク質をコードしており、神経組織での発現が高いことが知られています。近年の知見から、FAM171A1が軸索ガイダンスや神経突起伸長のプログラムと関連する可能性が示され、神経回路の結合性やシナプス構造の形成に寄与する役割が示唆されています。細胞表面受容体の環境や接着依存的シグナル伝達を調節する因子の候補として、FAM171A1は細胞骨格ダイナミクスや発生パターニングに関わる経路に影響を与える可能性があります。FAM171A1の発現変化や遺伝的多型は、神経発達および精神神経系の表現型に関する研究でも検討されており、神経系生物学の機構解明に向けた研究対象としての重要性が支持されています。
FAM171A1 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における FAM171A1 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、FAM171A1内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、FAM171A1の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、FAM171A1が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。