EXTL1 Lentiviral Activation Particles (h2): sc-409470-LAC-2

ヒトEXTL1は、エクソストシン様グリコシルトランスフェラーゼ1をコードしており、ゴルジ体に局在する酵素としてプロテオグリカン上のヘパラン硫酸鎖の生合成および伸長に関与し、その結果として細胞外マトリックスの組成や細胞表面における共受容体機能を形作る。ヘパラン硫酸の構築における役割を通じて、EXTL1は、グリコサミノグリカンによるリガンドの分布制御や受容体との結合に依存するFGF、WNT、Hedgehog経路などの主要なシグナル伝達ネットワークに影響を及ぼす。EXTL1活性の変化を含むヘパラン硫酸代謝の破綻は、発生過程の攪乱や、異常な細胞間コミュニケーションおよびマトリックスのリモデリングを伴う疾患との関連が示されている。ヒト細胞モデルにおいてEXTL1の遺伝子編集や機能撹乱を行うことは、糖鎖修飾依存的なシグナル伝達、プロテオグリカン生物学、ならびに経路特異的な読み出しの機構研究を支える。

EXTL1 レンチウイルス活性化粒子（h2）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なEXTL1の発現上昇を可能にします。

EXTL1 レンチウイルス活性化粒子（h2）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、EXTL1転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性EXTL1の発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のEXTL1ゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。