ETAR Lentiviral Activation Particles (m): sc-420111-LAC

マウスのEdnraは、エンドセリン受容体A型（ETAR）をコードしており、エンドセリン-1に選択的に結合するGタンパク質共役型受容体（GPCR）である。ETARは血管収縮、平滑筋の増殖、細胞外マトリックスのリモデリングを調節する。ETARシグナルは主としてGq/11に共役し、ホスホリパーゼCの活性化、Ca2+動員、PKC活性化を引き起こし、さらに下流でMAPK/ERK、RhoA/ROCK、PI3K/AKT経路を介して血管トーンや組織リモデリングを形成する。発生過程では、Ednraは神経堤由来の頭蓋顔面および心血管のパターニングに必須であり、その制御異常は肺高血圧、線維化、血管の炎症性リモデリングの基盤機構をモデル化するために用いられている。これらの特性により、Ednra/ETARは、内皮細胞・平滑筋細胞・間質細胞の各システムにおいて、GPCRシグナルの統合、収縮関連遺伝子プログラム、ならびにエンドセリン経路のクロストークを研究するうえで有用な結節点となる。

ETAR レンチウイルス活性化粒子（m）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なEdnraの発現上昇を可能にします。

ETAR レンチウイルス活性化粒子（m）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、Ednra転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性ETARの発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のEdnraゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。