Plásmido Doble Nickase (m) ERMAP: sc-424173-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)ERMAP consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ERMAP (m) y el plásmido de doble nickasa ERMAP (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Ermap. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ERMAP Anticuerpo (YS-6): sc-81790
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) ERMAP | sc-424173-NIC | 20 µg | $410.00 |
Ermap codifica la proteína asociada a la membrana del eritroblasto (ERMAP), una glicoproteína de membrana de la superfamilia de las inmunoglobulinas, enriquecida en células de la línea eritroide. En el ratón, ERMAP contribuye a la organización de la membrana del eritrocito y participa en procesos de reconocimiento célula–célula a través de sus dominios extracelulares tipo Ig, apoyando la maduración eritroide y la homeostasis de los glóbulos rojos. ERMAP está vinculada a la biología de los antígenos de grupo sanguíneo y se utiliza como marcador para estudiar la eritropoyesis, la estabilidad de la membrana y las interacciones mediadas por el sistema inmunitario en tejidos hematopoyéticos. La desregulación de proteínas de membrana eritroide, incluidos los complejos asociados a ERMAP, es relevante en modelos de anemia y de alteración de la adhesión o la depuración de los glóbulos rojos.
ERMAP El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Ermap en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Ermap. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Ermap. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Ermap alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.