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ERK 5双切口酶质粒(h) | sc-400891-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ERK 5双切口酶质粒(h2) | sc-400891-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MAPK7 编码 ERK5,这是一种非典型的丝裂原活化蛋白激酶(MAPK),在生长因子和细胞应激刺激下由其上游激酶 MEK5 激活。ERK5 将 MAPK 级联反应的信号进行整合,调控控制细胞增殖、生存、分化以及细胞骨架动态的转录程序,并在内皮功能和剪切力信号传导中发挥重要作用。ERK5 通过磷酸化底物并调控 MEF2 家族等转录因子,影响炎症信号传导以及细胞对微环境线索的适应。MAPK7/ERK5 活性失调与致癌信号网络的改变以及血管和炎症相关表型有关,因此它是在人类细胞中开展通路与机制研究的一个有用节点。
ERK 5 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 MAPK7 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对MAPK7内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏MAPK7的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了MAPK7基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。