Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ERCC1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400630-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ERCC1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ERCC1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ERCC1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ERCC1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ERCC1 Anticorpo (D-10): sc-17809
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ERCC1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400630-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ERCC1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400630-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ERCC1 codifica uma endonuclease específica de estrutura que forma um heterodímero com XPF (ERCC4) para realizar a incisão 5′ durante o reparo por excisão de nucleotídeos e para processar ligações cruzadas intercadeias do DNA e intermediários de replicação bloqueados. Esse complexo atua em vias de manutenção do genoma que resolvem lesões que distorcem a hélice e coordenam o reparo com a replicação, limitando assim o acúmulo de danos ao DNA e de aberrações cromossômicas. A atividade de ERCC1 está intimamente ligada às respostas celulares a fotoprodutos induzidos por UV e a uma variedade de adutos volumosos, com impactos a jusante na progressão do ciclo celular e na sinalização de apoptose. A capacidade de reparo mediada por ERCC1, quando desregulada, tem sido associada a fenótipos de estabilidade genômica alterados e é frequentemente investigada em estudos de redes de resposta a danos no DNA e de processos mutacionais.
ERCC1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ERCC1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ERCC1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ERCC1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ERCC1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.