Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
EP4 Antibody (C-4): sc-55596. Western blot analysis of EP4 expression in MOLT-4 (A), CCRF-CEM (B), RBL-1 (C) and C6 (D) whole cell lysates.
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EP4双切口酶质粒(h): sc-401146-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- EP4 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- EP4双切酶质粒（h）和EP4双切酶质粒（h2）编码针对PTGER4的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：EP4: sc-55596，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
EP4双切口酶质粒(h) | sc-401146-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
EP4双切口酶质粒(h2) | sc-401146-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PTGER4 编码人类前列腺素 E2 受体 EP4，这是一种 G 蛋白偶联受体（GPCR），主要通过 Gs 通路信号传导，提高 cAMP 水平并激活依赖 PKA/CREB 的转录程序。EP4 也可参与 β-arrestin 以及与 PI3K/AKT 和 ERK/MAPK 相关的信号通路，协同调控炎症反应、血管张力、上皮屏障功能和细胞迁移。在免疫与基质细胞环境中，EP4 在 COX 生成的 PGE2 下游调节细胞因子产生与白细胞转运，将前列腺素样物质信号与更广泛的免疫调控网络整合在一起。PTGER4/EP4 活性失衡与慢性炎症表型及组织稳态改变有关，因此可作为研究炎症相关疾病生物学机制的关键节点。
EP4 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 PTGER4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对PTGER4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏PTGER4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了PTGER4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。