EN1/Engrailed 1 Lentiviral Activation Particles (m): sc-420171-LAC

En1は、ホメオボックス型転写因子EN1（Engrailed 1）をコードしており、配列特異的なDNA結合性の転写制御因子として、マウスにおける中脳―後脳のパターン形成、小脳の発生、ならびに神経サブタイプのアイデンティティ確立に必須である。EN1は、細胞運命の決定、形態形成、軸索ガイダンスに影響する転写プログラムを協調させることで、発生過程の遺伝子制御ネットワークを調節する。分化した組織では、神経細胞の生存やシナプス機能を広範に転写制御することを通じて、神経回路の維持や細胞ストレス応答にも寄与する。EN1の発現または活性の破綻は、神経発生異常、回路形成、さらには神経変性や腫瘍性の転写リプログラミングに関連する機序の研究における足がかりとして用いられている。

EN1/Engrailed 1 レンチウイルス活性化粒子（m）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なEn1の発現上昇を可能にします。

EN1/Engrailed 1 レンチウイルス活性化粒子（m）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、En1転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性EN1/Engrailed 1の発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のEn1ゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。