ELOVL5 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-417429-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ELOVL5O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ELOVL5 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ELOVL5 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ELOVL5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ELOVL5 Anticorpo (B-3): sc-374138
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ELOVL5 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-417429-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ELOVL5 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-417429-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ELOVL5 codifica uma elongase que catalisa a extensão de ácidos graxos poli-insaturados de cadeia longa em ácidos graxos de cadeia muito longa, apoiando a síntese de lipídios de membrana e de mediadores de sinalização derivados de lipídios. Atua no metabolismo lipídico do retículo endoplasmático e se conecta a vias que regulam a remodelação de fosfolipídios, a disponibilidade de precursores de eicosanoides e docosanoides e respostas de estresse celular ligadas à composição de membrana. Alterações na atividade de ELOVL5 têm sido associadas à desregulação da homeostase lipídica em contextos metabólicos e inflamatórios e foram implicadas em fenótipos neurodegenerativos nos quais a composição de ácidos graxos influencia a função neuronal. Por isso, ELOVL5 é amplamente estudado em biologia de sistemas do metabolismo lipídico, dinâmica de membranas e pesquisas mecanísticas baseadas em lipidômica.
ELOVL5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ELOVL5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ELOVL5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ELOVL5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ELOVL5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.