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eIF3η双切口酶质粒(h) | sc-400817-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
eIF3η双切口酶质粒(h2) | sc-400817-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EIF3B 编码真核翻译起始因子 3 的 B 亚基(eIF3η),它是真核多亚基 eIF3 复合体的核心组成部分。该复合体作为支架将多种起始因子与 40S 核糖体亚基组织在一起,从而促进 mRNA 招募与起始密码子识别。作为帽依赖性翻译起始过程的一部分,eIF3η 有助于维持蛋白质稳态、推动细胞周期进程,并在细胞应激时介导适应性的翻译调控。eIF3 复合体功能的改变与增殖及应激反应表型中所见的蛋白质合成程序失调有关,因此 EIF3B 是研究翻译重编程的一个有价值的关键节点。由此,扰动 EIF3B 与生长信号及翻译控制机制的研究密切相关,而这些机制在疾病相关的细胞状态中经常发生重塑。
eIF3η 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 EIF3B 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对EIF3B内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏EIF3B的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了EIF3B基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。