Duffy Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-406288-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DuffyO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Duffy (h) e o Plasmídeo Double Nickase Duffy (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ACKR1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Duffy Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-406288-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Duffy Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-406288-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ACKR1 codifica o receptor do antígeno Duffy para quimiocinas (DARC), um receptor atípico de quimiocinas expresso de forma proeminente em células endoteliais venulares e em eritrócitos. O Duffy liga-se e sequestra múltiplas quimiocinas inflamatórias das famílias CC e CXC, moldando gradientes de quimiocinas que regulam o tráfego de leucócitos, a ativação endotelial e a resolução da inflamação. Por meio de seu papel como “sumidouro” e transportador de quimiocinas, o Duffy modula redes de sinalização inflamatória e influencia respostas do microambiente vascular. A variação genética e a expressão alterada de ACKR1 são usadas para estudar diferenças na homeostase de quimiocinas e no recrutamento de células imunes em contextos de doenças inflamatórias e hematológicas.
Duffy O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ACKR1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ACKR1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ACKR1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ACKR1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.