DTYMK Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405508-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DTYMKO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DTYMK (h) e o Plasmídeo Double Nickase DTYMK (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DTYMK. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DTYMK Anticorpo (B-8): sc-365925
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DTYMK Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405508-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DTYMK Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405508-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DTYMK codifica a desoxitimidilato quinase, uma enzima citosólica que fosforila dTMP em dTDP, fornecendo dTTP para a replicação e o reparo do DNA. Ao sustentar pools equilibrados de desoxirribonucleotídeos, o DTYMK contribui para a progressão da fase S, a estabilidade do genoma e as respostas celulares ao estresse de replicação. Alterações no metabolismo do timidilato e nas vias de salvamento de nucleotídeos podem influenciar a sinalização de dano ao DNA e a carga mutacional, tornando o DTYMK um ponto útil para estudar a homeostase de nucleotídeos em células proliferativas e sob estresse. Mudanças na expressão ou na atividade de DTYMK têm sido investigadas em contextos nos quais o metabolismo de nucleotídeos é reprogramado, incluindo a biologia do câncer e distúrbios associados à manutenção deficiente do DNA.
DTYMK O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DTYMK em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DTYMK. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DTYMK. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DTYMK interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.