Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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DNA Ligase III Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402841-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DNA Ligase IIIO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DNA Ligase III (h) e o Plasmídeo Double Nickase DNA Ligase III (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para LIG3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DNA Ligase III Anticorpo (E-7): sc-390922
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DNA Ligase III Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402841-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DNA Ligase III Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402841-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LIG3 codifica a DNA ligase III humana, uma ligase dependente de ATP que sela quebras de fita simples durante o reparo por excisão de bases e coordena o reparo de danos oxidativos no DNA por meio de interações com a XRCC1. A DNA ligase III também contribui para a junção de extremidades alternativa e participa de processos de manutenção do genoma que protegem as forquilhas de replicação e preservam a estabilidade cromossômica. Sua isoforma mitocondrial sustenta o reparo e a integridade do DNA mitocondrial, vinculando a função de LIG3 à bioenergética celular e às respostas ao estresse. A desregulação ou a perda da atividade de LIG3 está associada ao aumento da sinalização de dano ao DNA, ao aumento da carga mutacional e a fenótipos de instabilidade genômica relevantes para a biologia do câncer e para pesquisas em neurodegeneração.
DNA Ligase III O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus LIG3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de LIG3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função LIG3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com LIG3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.