Dlx-1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-420012

Panoramica

Dlx1 codifica il fattore di trascrizione homeobox Dlx-1, un regolatore legante il DNA che coordina i programmi di espressione genica necessari per il patterning embrionale e il neurosviluppo. Nel topo, Dlx-1 è coinvolto in modo rilevante nello sviluppo del prosencefalo, inclusi la specificazione, la migrazione e la differenziazione delle linee di interneuroni GABAergici, e contribuisce alla morfogenesi craniofacciale e degli archi branchiali. Attraverso il controllo trascrizionale di reti di sviluppo a valle, Dlx-1 influenza le decisioni di destino cellulare, il patterning dei tessuti e la maturazione dei circuiti neuronali. In letteratura, la deregolazione dei programmi genici associati a DLX1 è stata collegata a traiettorie di neurosviluppo alterate e a fenotipi oncogeni in determinati contesti cellulari, rendendolo rilevante per studi meccanicistici sulla differenziazione e su stati trascrizionali associati alla malattia.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Dlx-1 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Dlx1 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Dlx1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Dlx1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Dlx-1.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Dlx1 per lo studio della segnalazione di Dlx-1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Dlx1 critici per la funzione di Dlx-1
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Dlx1 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal Dlx-1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal Dlx-1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Dlx1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal Dlx-1 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR Dlx-1 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Dlx1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Dlx1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.