Plásmido Doble Nickase (h) DIO3: sc-403729-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)DIO3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa DIO3 (h) y el plásmido de doble nickasa DIO3 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a DIO3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) DIO3 | sc-403729-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) DIO3 | sc-403729-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DIO3 codifica la desyodasa de yodotironinas tipo III, una selenoenzima asociada al retículo endoplásmico que inactiva las hormonas tiroideas al convertir T4 en T3 inversa y T3 en T2, limitando así la señalización intracelular de las hormonas tiroideas. Al controlar la disponibilidad local de hormona, DIO3 influye en programas transcripcionales dependientes del receptor de hormona tiroidea que regulan la proliferación, la diferenciación y la homeostasis metabólica durante el desarrollo y la remodelación tisular. La expresión desregulada de DIO3 se asocia con una señalización endocrina alterada en cánceres y en contextos del desarrollo, y también se ha implicado en la regulación relacionada con la impronta genómica dentro de la región DLK1–DIO3. Estas características hacen de DIO3 un nodo útil para estudiar el metabolismo hormonal, la biología de las selenoproteínas sensibles al estado redox y la intercomunicación entre vías de señalización que moldea las transiciones del estado celular.
DIO3 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus DIO3 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de DIO3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de DIO3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con DIO3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.