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DGS8双切口酶质粒(h) | sc-404631-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DGS8双切口酶质粒(h2) | sc-404631-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DGCR8(DGS8)编码核内 Microprocessor 复合体的核心组分之一,与 DROSHA 协同识别并切割初级 microRNA(pri-miRNA)转录本,将其加工为前体 miRNA(pre-miRNA),从而塑造全局性的 miRNA 生物发生过程。通过这一作用,DGCR8 影响转录后基因调控程序,进而控制细胞周期进程、分化以及应激反应。DGCR8 依赖的 miRNA 通路与染色质调控及信号网络相互交织,精细调节谱系决定与 RNA 稳态。DGCR8 的剂量或功能改变与 miRNA 谱异常有关,并常在神经发育及增殖相关疾病机制的研究背景下被关注。
DGS8 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 DGCR8 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对DGCR8内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏DGCR8的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了DGCR8基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。