Plasmide Double Nickase (h) DDX21: sc-405770-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) DDX21 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide DDX21 Double Nickase (h) et le plasmide DDX21 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant DDX21. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: DDX21 Antibody (D-8): sc-376953
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) DDX21 | sc-405770-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) DDX21 | sc-405770-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DDX21 code une hélicase ARN de type DEAD-box localisée au nucléole, qui coordonne la transcription et la maturation de l’ARNr, la biogenèse des ribosomes et l’organisation nucléolaire de plus haut niveau. Grâce au remodelage, dépendant de l’ATP, des complexes ARN–protéines, DDX21 contribue à la transcription de l’ADNr pilotée par l’ARN polymérase I, à la maturation du pré‑ARNr et au couplage de la production ribosomique aux programmes de croissance cellulaire. DDX21 a également été impliquée dans la régulation de la traduction des ARNm et de la signalisation immunitaire innée via des interactions avec des espèces d’ARN et des assemblages ribonucléoprotéiques. La dérégulation de la fonction nucléolaire et des voies de biogenèse des ribosomes liées à DDX21 est associée à des réponses au stress prolifératif et à des programmes d’expression génique altérés observés dans de multiples contextes pathologiques.
DDX21 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus DDX21 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de DDX21. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de DDX21. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de DDX21.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.