Dcun1D1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405179-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Dcun1D1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Dcun1D1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Dcun1D1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DCUN1D1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Dcun1D1 Anticorpo (3E1): sc-81835
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Dcun1D1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405179-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Dcun1D1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405179-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DCUN1D1 codifica a Dcun1D1, um fator acessório das ligases E3 de ubiquitina do tipo cullin-RING que promove a neddilação de proteínas cullin e, assim, aumenta a proteostase dependente de ubiquitina. Por meio da regulação da ativação de cullins, a Dcun1D1 influencia a progressão do ciclo celular, as respostas a danos no DNA e a degradação, dependente de sinalização, de proteínas regulatórias-chave. A expressão alterada ou a amplificação de DCUN1D1 tem sido associada a programas de crescimento desregulados e foi relatada em múltiplos contextos tumorais, sustentando seu uso como um nó molecular para o estudo de vias oncogênicas de modificação do tipo ubiquitina. Pesquisas sobre DCUN1D1 ajudam a esclarecer como a conjugação de NEDD8 interage com a ubiquitinação para controlar a estabilidade proteica e a aptidão celular sob estresse.
Dcun1D1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DCUN1D1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DCUN1D1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DCUN1D1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DCUN1D1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.