Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Dab2 Plasmide Double Nickase (m): sc-419936-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Dab2 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Dab2 Double Nickase Plasmid (m) e il Dab2 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Dab2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Dab2 Antibody (E-11): sc-136964
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Dab2 Plasmide Double Nickase (m) | sc-419936-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Dab2 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-419936-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Disabled homolog 2 (Dab2) codifica una proteina adattatrice dell’endocitosi che collega i recettori di carico alla macchina di internalizzazione mediata da clatrina attraverso interazioni con clatrina, AP-2 e fosfolipidi. Nelle cellule murine, DAB2 partecipa al traffico dei recettori e all’attenuazione del segnale, influenzando vie come TGF-β e Wnt/β-catenina modulando la disponibilità dei recettori e l’intensità della segnalazione a valle. Contribuisce inoltre alla polarità epiteliale, all’adesione cellulare e all’organizzazione del citoscheletro, processi centrali per la patterning dello sviluppo e l’omeostasi tissutale. Un’espressione o una funzione disregolata di DAB2 è stata associata, in modelli sperimentali, ad alterazioni della differenziazione e a fenotipi migratori rilevanti per la biologia del cancro e per il rimodellamento fibrotico o infiammatorio.
Dab2 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Dab2 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Dab2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Dab2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Dab2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.