D1DR/Dopamine Receptor D1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400532-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- D1DR/Dopamine Receptor D1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase D1DR/Dopamine Receptor D1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase D1DR/Dopamine Receptor D1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DRD1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:D1DR/Dopamine Receptor D1 Anticorpo (A-1): sc-518273
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
D1DR/Dopamine Receptor D1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400532-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
D1DR/Dopamine Receptor D1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400532-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DRD1 codifica o receptor de dopamina D1 (D1DR), um receptor acoplado à proteína G que se acopla principalmente a Gαs/olf para estimular a adenilil ciclase, elevar os níveis de cAMP e ativar a sinalização dependente de PKA. A sinalização do D1DR modula a excitabilidade neuronal e a plasticidade sináptica por meio da regulação de canais iônicos, da transcrição mediada por CREB e da comunicação cruzada com as vias MAPK/ERK. No sistema nervoso central, o DRD1 é um componente-chave da neurotransmissão dopaminérgica em circuitos estriatais e corticais, influenciando o controle motor, a aprendizagem por recompensa e a cognição. A desregulação da sinalização e da expressão do receptor DRD1 é frequentemente investigada no contexto de mecanismos de doenças neuropsiquiátricas e neurodegenerativas, incluindo a doença de Parkinson e a esquizofrenia, bem como adaptações relacionadas ao uso de substâncias.
D1DR/Dopamine Receptor D1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DRD1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DRD1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DRD1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DRD1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.