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CYPOR双切口酶质粒(h) | sc-402375-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CYPOR双切口酶质粒(h2) | sc-402375-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 POR 基因编码细胞色素 P450 氧化还原酶(CYPOR),这是一种关键的黄素蛋白,负责将 NADPH 的电子传递给内质网中的微粒体细胞色素 P450 酶。该活性通过支持依赖 CYP 的单加氧酶反应,参与外源性物质代谢、类固醇激素生物合成、脂肪酸氧化以及更广泛的氧化还原稳态维持。因此,POR 的功能与药物代谢通路和内分泌类固醇生成网络相互交织,并影响细胞应激反应与代谢表型。POR 的遗传或功能扰动与类固醇生成相关疾病及不同的药物基因组学反应有关,使其成为在类肝细胞模型和类固醇生成细胞模型中开展机制研究的有用靶点。
CYPOR 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 POR 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对POR内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏POR的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了POR基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。