非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
CyPA 抗体 (6-YD13): sc-134310. Jurkat (A), A-431 (B) 和 HeLa (C) 全细胞裂解液中 CyPA 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
CyPA双切口酶质粒(h): sc-418155-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- CyPA 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- CyPA双切酶质粒（h）和CyPA双切酶质粒（h2）编码针对PPIA的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：CyPA: sc-134310，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
CyPA双切口酶质粒(h) | sc-418155-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CyPA双切口酶质粒(h2) | sc-418155-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PPIA 编码环孢素A（cyclophilin A，CyPA），这是一种广泛表达的肽基脯氨酰顺反异构酶，能够在细胞质和细胞核中加速蛋白质折叠与构象切换。CyPA 参与调控蛋白质稳态与应激响应信号通路，包括伴侣蛋白相关通路，以及对激酶和转录因子活性的调节，从而影响细胞凋亡、炎症反应和细胞周期进程。通过与 CD147/BSG 等互作伙伴及多种客户蛋白的相互作用，CyPA 可影响白细胞迁移与氧化应激反应，并因此与心血管、神经炎症及肿瘤相关过程相联系。在多种疾病背景中均有关于 PPIA 表达或 CyPA 活性异常的报道，使其成为研究信号转导、蛋白质稳态以及宿主—病原体相互作用机制的有用靶点。
CyPA 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 PPIA 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对PPIA内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏PPIA的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了PPIA基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。