CYP2J6 Plasmídeo de ativação de CRISPR (m): sc-419921-ACT

O gene murino **Cyp2j6** codifica a **CYP2J6**, uma monooxigenase do citocromo P450 que catalisa o metabolismo oxidativo de lipídios endógenos e xenobióticos, incluindo a formação de ácidos graxos epóxi bioativos a partir de ácidos graxos poli-insaturados. Por meio da modulação do ácido araquidônico e de redes relacionadas de eicosanoides, a CYP2J6 pode influenciar o equilíbrio redox, a sinalização inflamatória e processos associados ao tônus vascular. A variação na expressão de **Cyp2j6** é relevante para estudos de metabolismo de fármacos hepático e extra-hepático, toxicidade química e biologia de mediadores lipídicos em modelos murinos. Sua atividade se cruza com vias que moldam respostas ao estresse oxidativo e a homeostase inflamatória, fornecendo contexto mecanístico para fenótipos cardiometabólicos e imunometabólicos em pesquisas pré-clínicas.

CYP2J6 O Plasmídeo de Ativação CRISPR (m) oferece uma abordagem direcionada e não destrutiva para regular positivamente a expressão endógena de Cyp2j6 sem alterar a sequência de ADN subjacente.

CYP2J6 O Plasmídeo de Ativação CRISPR (m) é um sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) de três plasmídeos, concebido para a regulação positiva transcricional altamente eficiente e específica do locus Cyp2j6 em linhas celulares humanas. O sistema é construído em torno de uma Cas9 cataliticamente inativa (dCas9) portadora de duas mutações inativadoras (D10A e N863A) que eliminam a atividade nuclease, preservando simultaneamente a ligação ao ADN. Esta dCas9 é fundida com VP64, um potente ativador transcricional, e é coexpressa com um gene de resistência à blasticidina para seleção. O segundo plasmídeo codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1, um complexo ativador secundário que atua em conjunto com o dCas9-VP64, juntamente com um gene de resistência à higromicina. O terceiro plasmídeo codifica um sgRNA de 20 nt específico para o alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 que recrutam o complexo MS2-p65-HSF1 para o local de ativação, acompanhado por um gene de resistência à puromicina. Os três plasmídeos são administrados numa proporção de massa de 1:1:1 para uma expressão equilibrada de todos os componentes do sistema.

Uma vez montado no locus alvo, o complexo SAM liga-se a cerca de 200 pb a montante do local de início da transcrição Cyp2j6, onde VP64, p65 e HSF1 atuam em conjunto para recrutar a maquinaria transcricional e impulsionar a regulação positiva da expressão endógena de CYP2J6. Ao contrário da Cas9 com atividade nuclease, o dCas9 não introduz quebras de cadeia dupla nem modifica a sequência genómica, preservando o locus Cyp2j6 nativo e permitindo o estudo de respostas transcricionais dependentes de CYP2J6 no locus endógeno, tornando-o uma ferramenta valiosa para estudos funcionais, identificação de genes-alvo e modelagem da restauração da via CYP2J6 em células tumorais com expressão de Cyp2j6 silenciada ou reduzida.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.