CYP21A2 Lentiviral Activation Particles (h): sc-402919-LAC

CYP21A2は、シトクロムP450 21-ヒドロキシラーゼをコードしており、これは小胞体に局在するモノオキシゲナーゼです。副腎におけるステロイド生合成で重要な21位水酸化反応を触媒し、プロゲステロンおよび17α-ヒドロキシプロゲステロンを、鉱質コルチコイドや糖質コルチコイドの生合成へと導く変換に関与します。この酵素はヘム依存性のP450レドックス反応として機能し、コレステロール由来ホルモンの経路と統合されることで、副腎の層構造（ゾーネーション）、内分泌フィードバック、細胞の代謝状態を形成します。CYP21A2活性の変化は先天性副腎過形成の表現型と強く関連しており、適切な細胞モデルにおいて、ステロイド前駆体の蓄積、コルチゾール／アルドステロン産生の破綻、ならびに下流シグナル伝達への影響を研究するための分子学的な入り口となります。さらに、CYP21A2は高い相同性をもつ偽遺伝子CYP21A1Pの近傍という複雑なゲノム領域に存在するため、機序解明の研究では座位特異的な制御を精密に解析することが重要となる場合が少なくありません。

CYP21A2 レンチウイルス活性化粒子（h）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なCYP21A2の発現上昇を可能にします。

CYP21A2 レンチウイルス活性化粒子（h）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、CYP21A2転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性CYP21A2の発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のCYP21A2ゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。