cyclin G2 Double Nickaseプラスミド (h): sc-403620-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- cyclin G2 Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- cyclin G2ダブルニカースプラスミド（h）およびcyclin G2ダブルニカースプラスミド（h2）は、CCNG2を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: cyclin G2 抗体 (1F9-C11): sc-293302
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
cyclin G2 Double Nickaseプラスミド (h) | sc-403620-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
cyclin G2 Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-403620-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CCNG2はサイクリンG2をコードしており、サイクリンG2は非典型的なサイクリンとして、増殖抑制性の刺激によってしばしば誘導され、特にG1/S移行期付近における細胞周期進行の負の制御に寄与します。サイクリンG2はストレス応答性シグナル伝達と連動し、ホスファターゼ活性やリン酸化依存性経路に影響を与える相互作用を介して、チェックポイント制御や細胞増殖を調節し得ます。CCNG2の発現異常は、増殖や分化プログラムの破綻と関連づけられており、腫瘍生物学、組織恒常性、状況依存的な増殖抑制の研究において重要です。また、その制御機能は、細胞老化や、遺伝毒性ストレス／代謝ストレスへの適応といった細胞応答とも関連します。
cyclin G2 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における CCNG2 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、CCNG2内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、CCNG2の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、CCNG2が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。