CXCL16 Double Nickaseプラスミド (h): sc-405248-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- CXCL16 Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- CXCL16ダブルニカースプラスミド（h）およびCXCL16ダブルニカースプラスミド（h2）は、CXCL16を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: CXCL16 抗体 (C-5): sc-514363
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
CXCL16 Double Nickaseプラスミド (h) | sc-405248-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CXCL16 Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-405248-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CXCL16は膜貫通型ケモカインをコードしており、プロテアーゼによって切断・遊離されることで、CXCR6の可溶性リガンドを生成します。これにより、活性化T細胞、NK細胞、その他の白血球サブセットの走化性と組織内での保持が協調的に制御されます。CXCR6依存的なシグナル伝達を介して、CXCL16は白血球の遊走、接着、ならびに組織内の炎症性クロストークに寄与し、ケモカイン勾配を免疫監視や組織リモデリングと結び付けます。膜結合型のCXCL16は、酸化脂質やアポトーシス由来のデブリに対するスカベンジャー受容体としても機能し、自然免疫による認識を炎症性シグナル伝達経路と連結します。CXCL16/CXCR6軸の活性の破綻は、慢性炎症性疾患、動脈硬化関連プロセス、腫瘍免疫微小環境のダイナミクスと関連して報告されており、免疫病態の機序研究における重要な標的となっています。
CXCL16 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における CXCL16 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、CXCL16内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、CXCL16の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、CXCL16が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。