Csk Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400992-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CskO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Csk (h) e o Plasmídeo Double Nickase Csk (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CSK. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Csk Anticorpo (E-3): sc-166560
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Csk Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400992-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Csk Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400992-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CSK codifica a Csk, uma tirosina quinase citosólica que regula negativamente as quinases da família Src ao fosforilar a tirosina inibitória C-terminal, limitando assim a amplitude da sinalização a jusante de receptores imunes, integrinas e receptores de fatores de crescimento. Por meio dessa função de “porteiro”, a Csk influencia a adesão e a migração celular, a remodelagem do citoesqueleto e a transdução de sinais próxima ao receptor em vias como a sinalização do receptor de células T e a sinalização de adesão focal. Alterações na atividade ou na regulação de CSK podem perturbar redes de fosforilação que definem os limiares de ativação de células imunes e programas de sinalização proliferativa. O controle desregulado das quinases da família Src ligado a CSK tem sido associado a contextos de sinalização imunomediada e oncogênica, sustentando seu estudo em modelos mecanísticos de homeostase de sinalização.
Csk O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CSK em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CSK. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CSK. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CSK interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.