CREB3L4 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-417626-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CREB3L4O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CREB3L4 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CREB3L4 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CREB3L4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CREB3L4 Anticorpo (D-8): sc-514052
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CREB3L4 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-417626-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CREB3L4 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-417626-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CREB3L4 (proteína 3 tipo 4 semelhante à proteína de ligação ao elemento responsivo a cAMP) é um fator de transcrição bZIP ancorado à membrana do retículo endoplasmático (RE) que pode ser ativado por proteólise intramembranar regulada para modular programas de expressão gênica ligados à homeostase da via secretora. Participa de respostas celulares associadas à sinalização de estresse do RE e a redes transcricionais relacionadas à resposta a proteínas mal dobradas (UPR), influenciando a diferenciação e a adaptação metabólica. A atividade de CREB3L4 tem sido estudada em tecidos responsivos a hormônios e em cânceres, nos quais a expressão alterada ou os resultados transcricionais a jusante podem correlacionar-se com mudanças na proliferação, na sinalização de sobrevivência e em fenótipos invasivos. Essas propriedades tornam o CREB3L4 um alvo útil para dissecar mecanismos de controle transcricional que conectam a função do RE a estados celulares associados a doenças.
CREB3L4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CREB3L4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CREB3L4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CREB3L4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CREB3L4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.