CRABP-II Lentiviral Activation Particles (h2): sc-402978-LAC-2

ヒトのCRABP2は細胞内レチノイン酸結合タンパク質II（CRABP-II）をコードしており、全トランス型レチノイン酸を高親和性で結合する細胞質キャリアとしてその濃度を緩衝しつつ、核内のレチノイン酸受容体（RAR）へ届けることで、レチノイド依存的な転写プログラムの形成に寄与する。リガンドの利用可能性と細胞内輸送を制御することにより、CRABP-IIは上皮の分化、ケラチノサイトの成熟、その他のレチノイン酸（RA）駆動性プロセスに影響を及ぼし、増殖やアポトーシス、発生関連遺伝子ネットワークの制御とも結び付いている。CRABP2発現の異常やレチノイドシグナル伝達の変化は、がんの生物学や炎症性皮膚疾患との関連が報告されており、経路のリワイヤリングや状況依存的なRA応答を研究する上で重要な標的となる。CRABP2に焦点を当てた遺伝子編集は、レチノイン酸シグナルの機構解析、RAR活性化下流で生じる転写およびクロマチン変化のマッピング、さらに分化モデルや腫瘍形成モデルにおける機能スクリーニングを可能にする。

CRABP-II レンチウイルス活性化粒子（h2）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なCRABP2の発現上昇を可能にします。

CRABP-II レンチウイルス活性化粒子（h2）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、CRABP2転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性CRABP-IIの発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のCRABP2ゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。